Në kërkimin biologjik, zakonisht përdoren polipeptide me një sekuencë të gjatë.Për peptidet me më shumë se 60 aminoacide në sekuencë, shprehja e gjeneve dhe SDS-PAGE përdoren përgjithësisht për t'i marrë ato.Megjithatë, kjo metodë kërkon një kohë të gjatë dhe efekti i ndarjes së produktit përfundimtar nuk është i mirë.
Sfidat dhe zgjidhjet për sintezën e gjatë të peptideve
Në sintezën e peptideve të gjata, ne gjithmonë përballemi me një problem, domethënë, pengesa sterike e reaksionit të kondensimit rritet me rritjen e sekuencës në sintezë dhe koha e reagimit duhet të rregullohet për ta bërë reagimin të plotë.Megjithatë, sa më e gjatë të jetë koha e reagimit, aq më shumë efekte anësore prodhohen dhe një pjesë e peptidit të synuar formohet.Mbetjet e tilla - zinxhirët peptidikë të mangët janë papastërtitë kryesore të prodhuara në sintezën e gjatë të peptideve.Prandaj, në sintezën e peptidit të gjatë, problemi kryesor që duhet të kapërcejmë është të eksplorojmë kushtet e reagimit me cilësi të lartë dhe metodat e reagimit, në mënyrë që të bëjmë reagimin e kondensimit të aminoacideve më gjithëpërfshirës dhe të plotë.Për më tepër, zvogëloni kohën e reagimit, sepse sa më e gjatë të jetë koha e reagimit, aq më të pakontrollueshme janë reagimet anësore, aq më komplekse janë nënproduktet.Prandaj, tre pikat e mëposhtme janë përmbledhur:
Sinteza me mikrovalë mund të përdoret: Për disa aminoacide që hasen në procesin e sintezës që nuk janë të lehta për t'u integruar, mund të përdoret sinteza me mikrovalë.Kjo metodë ka rezultate të jashtëzakonshme dhe redukton në masë të madhe kohën e reagimit dhe redukton formimin e dy nënprodukteve kryesore.
Mund të përdoret metoda e sintezës së fragmenteve: Kur disa peptide janë të vështira për t'u sintetizuar me metoda të zakonshme të sintezës dhe nuk janë të lehta për t'u pastruar, ne mund të përvetësojmë të gjithë kondensimin e disa aminoacideve në një segment të caktuar të peptidit në zinxhirin peptid në tërësi.Kjo metodë gjithashtu mund të zgjidhë shumë probleme në sintezë.
Mund të përdoret sinteza e acilhidraziditSinteza acylhydrazide e peptideve është një metodë e sintezës në fazën e ngurtë të peptidit N-terminal Cys dhe polipeptidit C-terminal hydrazide reaksion kimik selektiv ndërmjet formimit të lidhjeve amide për të arritur metodën e lidhjes peptide.Bazuar në pozicionin e Cys në zinxhirin peptid, kjo metodë e ndan të gjithë zinxhirin peptid në sekuenca të shumta dhe i sintetizon ato përkatësisht.Së fundi, peptidi i synuar fitohet përmes reaksionit të kondensimit në fazë të lëngët.Kjo metodë jo vetëm që redukton shumë kohën e sintezës së peptidit të gjatë, por gjithashtu rrit ndjeshëm pastërtinë e produktit përfundimtar.
Pastrim i gjatë i peptideve
Veçantia e peptideve të gjata çon në mënyrë të pashmangshme në përbërës komplekse të peptideve të papërpunuara.Prandaj, është gjithashtu një sfidë për të pastruar peptidet e gjata me HPLC.seri amiloide e procesit të pastrimit të polipeptideve, duke thithur shumë përvojë dhe përdoret me sukses në pastrimin e peptideve të gjata.Duke adoptuar pajisje të reja, përzierjen e sistemeve të shumëfishta të pastrimit, ndarjen e përsëritur dhe metoda të tjera të përvojës, shkalla e suksesit të pastrimit të gjatë të peptideve u përmirësua shumë.
Koha e postimit: Prill-18-2023