Antigjenet e proteinave rekombinante shpesh kanë disa epitopë të ndryshëm, disa prej të cilëve janë epitopë të sekuencës dhe disa janë epitopë strukturorë.Antitrupat poliklonalë të marrë nga imunizimi i kafshëve me antigjene të denatyruar janë përzierje antitrupash specifike për epitope individuale dhe mund të përdoren në përgjithësi për të zbuluar strukturat natyrore ose proteinat e synuara të denatyruara.Një përfitim anësor i përdorimit të proteinave të denatyruara si imunogjene është se proteinat e denatyruara priren të jenë më imunogjene dhe mund të stimulojnë një përgjigje të fortë imune tek kafshët.
Sistemi i shprehjes së Escherichia coli zakonisht zgjidhet për qëllime antigjenike sepse është sistemi më i kushtueshëm për sa i përket kohës dhe parave.Për të përmirësuar mundësinë e shprehjes së proteinës së synuar dhe lehtësinë e pastrimit, ndonjëherë shprehet vetëm një fragment i vogël i proteinës së synuar, siç është një domen specifik.
Struktura tredimensionale e proteinave
Domeni specifik i një proteine
Nëse qëllimi i përgatitjes së antitrupave është vetëm për zbulimin wb, është ekonomike dhe e shpejtë të përdoret peptid i vogël sintetik si antigjen, por ekziston rreziku i imunogjenitetit të dobët ose jo-rigjenicitetit për shkak të përzgjedhjes së papërshtatshme të segmentit peptid.Meqenëse përgatitja e antitrupave kërkon një periudhë të gjatë, shpesh zgjidhen dy ose tre segmente të ndryshme peptide për të përgatitur antitrupa duke përdorur antigjen polipeptid për të siguruar shkallën e suksesit të eksperimentit.
Pastërtia e antigjenit polipeptid për imunizimin kërkohet të jetë më e madhe se 80%.Megjithëse një pastërti më e lartë teorikisht mund të marrë antitrupa me specifikë më të mirë, në praktikë, kafshët prodhojnë gjithmonë një numër të madh antitrupash jo specifikë, duke maskuar kështu përfitimet e pastërtisë së antigjenit.
Përveç kësaj, përgatitja e antitrupave nga peptide të vogla duhet të lidhet me antigjenin e duhur bartës për të rritur imunogjenitetin e tij.Dy bartës të zakonshëm antigjenikë janë KLH dhe BSA.
Koha e postimit: Mar-23-2023